Замораживание цитратных пробирок с пробами является частью рутинных лабораторных задач. Зачастую, это вызвано тем, что часть коагуляционных тестов собирают в течение определенного времени, накапливая партию, чтобы проанализировать за один раз. Это позволяет оптимизировать расход реагентов. Ранее была описана стабильность аналитов в цитратных пробирках в свежих или замороженных образцах, но статей о стабильности параметров гемостаза после оттаивания проб практически нет.
Целью данного исследования было определить стабильность основных параметров коагуляции (крови, взятой в силиконизированные вакуумные пробирки CTAD и подвергнутой двойному центрифугированию) после одного цикла замораживания/оттаивания, чтобы разработать рекомендации по обращению с данными пробами.
Материалы и методы
Такие исследования, как: протромбиновое время (ПВ), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), фибриноген, D-димеры, факторы свертывания крови (F), белок C, белок S, антитромбин, АЧТВ, чувствительность к волчаночному антикоагулянту (LA) и тест с использованием разведенного яда гадюки Рассела (dRVVT) оценивали в 60 образцах плазмы (n = 30, нормальный диапазон, и n = 30, вне нормального диапазона). Тридцать образцов от пациентов, получающих антикоагулянты (нефракционированный гепарин (НФГ), низкомолекулярный гепарин (НМГ), апиксабан или ривароксабан) были оценены с использованием специфических антикоагулянтных тестов. Замороженные образцы размораживали и проводили исследование через определенные временные интервалы: через 15 минут, 2 часа, 4 часа и 6 часов после оттаивания. Стабильность показателей коагуляции оценивали с использованием критерия обнаружения значимых изменений результатов (rejection limit).
Результаты исследований
Результаты исследований показали, что после оттаивания активность АЧТВ, ПВ, фибриногена, D-димеров, FII, FV, FX, FIX, FXI, FXII, PC и анти-Xa-активность НФГ оставались стабильными в течение как минимум 6 часов, FVII – в течение 5 часов, PS, AT, скрининговый анализ dRVVT и анти-Ха-активность НМГ – в течение 4 часов, LA-чувствительность АЧТВ и апиксабана-специфическая анти-Ха-активность – в течение 3 часов. FVIII, подтверждающий тест dRVVT и специфическая анти-Ха активность ривароксабана оставались стабильными в течение 2 часов.
Мнение специалиста
Полученные результаты показывают, что стабильность образцов для некоторых параметров гемостаза ограничена после оттаивания. Это следует учитывать при проведении исследований.
Для написания статьи использовались следующие источники:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35029031/
